新型多臂免疫磁珠用于表位特异性中和抗体的纯化

来源：X一MOL资讯

抗体是机体在抗原物质刺激下由B细胞分化成的浆细胞所产生的、可与相应抗原发生特异性结合反应的免疫球蛋白。表位特异性中和抗体是一种可以识别特定表位的免疫球蛋白，其与病毒结合，可有效阻止病毒对宿主细胞的感染。

目前常用的杂交瘤技术制备的抗体多为鼠源性，在其他物种体内具有免疫原性，用于人体可产生人抗鼠抗体反应，从而影响治疗效果。直接从免疫血清中分离纯化高特异性抗体可很好的解决这个问题。免疫磁珠作为抗体纯化的有力工具，针对磁珠本身的结构设计和性能提升的研究，是材料科学和生命科学的交叉热点。获得结构稳固、亲和配体接枝率高、成本低廉的免疫磁珠对抗体纯化工艺的发展具有重要的意义。最近，吉林大学团队建立了一种新的表位特异性抗体制备方法，该方法采用一种动态模板聚合法（IDDT），在短时间内成功制备了多臂有机-无机杂化磁珠，突破了微纳尺度下球状基体表面聚合物三维拓扑结构修饰的难点，在磁珠表面成功构筑了多臂纳米化结构。进一步利用多臂结构上的残余双键与末端带有半胱氨酸的抗原表位进行Click反应，得到了可用于分离纯化相应表位特异性抗体的多臂免疫磁珠。

该多臂免疫磁珠制备成本低、反应条件温和、层间结构稳定（有机层直接包裹磁核）、比表面积大、表位负载量高（多臂纤维结构提供更多共价反应结合位点），而且柔性聚合物交联纤维具有更好的机械稳定性能（适用于苛刻环境，重复利用率高），是一种优良的生物捕获-分离材料。与不具备三维拓扑结构的磁珠相比，其对特异性抗体的纯化效率可提高一倍以上，充分体现了其“多臂”功力。经分离纯化得到的抗体能够特异性识别相对应的抗原，有效阻止病毒对细胞的入侵，具有良好的中和活性。

该方法为免疫磁珠的结构设计提供了一种全新的思路，易于获得高特异性的中和抗体，且获得的抗体具有检测和治疗相应病毒感染的能力，可以作为预防、诊断和治疗的候选试剂。该方法同样适用于其它抗原表位，为制备用于治疗感染性和非感染性疾病的抗体药物提供了新的途径，具有重要的理论和实际意义。

这一成果近期发表在Analytical Chemistry 上，文章通讯作者为吉林大学的欧阳红生、刘俊秋和逄大欣三位教授，第一作者为吕冬梅博士后和董海司博士。

Magnetic Multiarm Scaffold for the One-step Purification of Epitope-Specific Neutralizing Antibodies

Dongmei Lv, Haisi Dong, Ang Su, Ying Qin, Jianwei Dong, Lerong Ma, Jianing Li, Huping Jiao, Mingjun Zhang, Daxin Pang, Junqiu Liu, Hongsheng Ouyang

Anal. Chem., 2019, 9, 6172-6179, DOI: 10.1021/acs.analchem.9b00769