新方法再次提高单细胞蛋白质组学质谱定量准确度

BioArt植物  |   2021-01-25 20:10

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单细胞蛋白质组学在蛋白丰度检测、转录修饰和翻译后修饰方面填补了单细胞转录组学的空白。单细胞蛋白质组学质谱(SCoPE-MS)是近年来兴起的一种定量分析多功能单细胞蛋白质组的方法,这种方法采用同位素标记和载体蛋白质组学来分析单个细胞【1】。同位素标记具有相同质量的化学标签,其中包含了独特的质量条码,这些条码能够通过肽片段化显示出来,进而进行定量分析,它的优点是所有样品中的肽在质谱图中均显示一个峰,从而增加了信号强度,并且能够同时分离肽离子【2】(图1)

图1. 图解单细胞蛋白质组学质谱技术

SCoPE-MS利用这一特性,通过将“载体”样品加入单细胞蛋白质组100倍至200倍水平,可以分析单细胞蛋白质组【1,3】。虽然这项技术的出现令人鼓舞,但是当载体蛋白质组加入的量过高时,从单细胞组获得的数据准确性和它的生物学结论都大打折扣。

近日,来自Genentech的Christopher M. Rose 与慕尼黑工业大学Bernhard Kuster团队合作在Nature Methods杂志上发表题为Defining the carrier proteome limit for single-cell proteomics的研究论文,这篇论文给出了载体蛋白质组水平和SCoPE-MS定量准确性之间的关系,为未来单细胞蛋白质组学的实验设计、数据收集和数据分析提供了指导,同时作者介绍了自己研发的程序SCPComponsion,这个程序能够对单细胞蛋白质组学质谱进行快速的质量控制分析。

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