微生物培养技术

科技工作者之家  |   2020-11-17 17:24

能满足微生物营养和某些环境条件,使迅速生长增殖,表现其生理作用或产生某种代谢产物的操作技术。培养微生物因种类和目的不同,采用的培养基成分、性状和培养条件亦异。

培养基

人工配合各种营养物质供微生物生长的基质。培养基还可满足微生物对部分环境条件,如pH值、氧化还原势等的要求。根据营养成分的来源,有用纯化学物质配合的,成分稳定的合成培养基有用动、植物体的组织或它们的煮汁、体液、土壤浸液等成分不明确,但能提供特殊营养的天然培养基;有以天然物质为主,配以适量的化学物质,营养丰富的综合培养基。在微生物的分类鉴定工作以及生理代谢和遗传研究中,为便于分析其营养特性,采用成分稳定的合成培养基为培养某些寄生性微生物或在原来生活环境中方能获得的特殊有机营养而满足其生长要求,采用某些天然培养基为迅速获得生物量或为产生某种代谢产物,则选用营养较全面和丰富的综合培养基。

简介能满足微生物营养和某些环境条件,使迅速生长增殖,表现其生理作用或产生某种代谢产物的操作技术。培养微生物因种类和目的不同,采用的培养基成分、性状和培养条件亦异。1

培养基人工配合各种营养物质供微生物生长的基质。培养基还可满足微生物对部分环境条件,如pH值、氧化还原势等的要求。根据营养成分的来源,有用纯化学物质配合的,成分稳定的合成培养基有用动、植物体的组织或它们的煮汁、体液、土壤浸液等成分不明确,但能提供特殊营养的天然培养基;有以天然物质为主,配以适量的化学物质,营养丰富的综合培养基。在微生物的分类鉴定工作以及生理代谢和遗传研究中,为便于分析其营养特性,采用成分稳定的合成培养基为培养某些寄生性微生物或在原来生活环境中方能获得的特殊有机营养而满足其生长要求,采用某些天然培养基为迅速获得生物量或为产生某种代谢产物,则选用营养较全面和丰富的综合培养基。1

接种与移植移植系指从一培养物(原种培养)移种于新培养基上,目的为得到继代培养接种系指挑取被检材料移植于培养基或活体而言,通常均混称之为接种,泛指在无菌条件下,用接种环、接种针、移液管或滴管等接种工具,把微生物转移到培养基或其他基质上,这是微生物学重要基本操作。根据实验目的不同,接种方式有划线、穿刺和点接等。接种时通常都应在无菌室或超净工作台上进行,应严格注意无菌操作。

通常将保藏的某菌种移植在斜面或液体培养基中扩大后,用以接种新的培养基,使获得大量生长,发生某种生理作用或产生某种代谢产物。细菌和酵母菌用对数生长期的细胞作母种接种在新的培养基中,可缩短滞留适应期,提早以对数生长速度增殖。接种量九在培养基中达到一定生长量所需的时间短。真菌和放线菌通常都以孢子期作原种保藏用孢子接种使发育成菌丝体后,用菌丝体接种新的培养基。

由于各类微生物的生活习性不同,也因培养目的不一,常选用不同的培养方法。1

表面培养好气性和兼嫌气性微生物在固体培养基平皿表面生长形成菌瀛或在斜面上形成菌苔,以及在液体培养基表面形成菌膜或菌环等形态结构,观察它们的生长习性和比较它们的生长速度和生长量。在分离和纯化这些微生物种时,常用系列稀释的菌液接种琼脂培养基,倾注平皿后,在培养基表面发育分散的菌落中,挑取单菌落进行分离和纯化,也可计数平皿表面菌落数,乘以稀释倍数,计算原菌液中的活菌数,在保藏菌种时,则常在琼脂培养基的斜面上接种,经培养,使长出丰满的菌苔后,保藏。1

液体振荡培养好气性或兼嫌气性微生物在浅层液体培养基中,通过机械振瀛增加培养液的通气量,使能获得足够的氧和均匀地接受营养物质而迅速生长繁殖,可作扩大菌种、增加生长量的需要,也用于代谢生理的研究,分析和,提取代谢产物。1

液体深层培养以获得大量发酵产物为目的的发酵罐大容量液体培养,对嫌气性细菌如丁醇丙酮梭菌,保持发酵罐中深层培养液的缺氧条件,调节培养液的合适pH值和温度,使丁醇丙酮梭菌在嫌气环境中能迅速生长,发酵淀粉和糖类产生丁酸和丙酮。对好气性和兼嫌气性微生物,则开动发酵罐的通气和搅拌装置,将压缩在储气罐内经过滤除菌后的空气通入发酵罐内,以控制空气流量,调节罐内培养液中的供氧量。一方面保持微生物生长发育所需的适量氧气;另一方面也利用压缩空气的流入而使培养液翻搅,上下混和,均匀分布营养物质促使迅速生长,增加生物量,产生多量代谢产物,是发酵工业生产的基本培养方法。1

本词条内容贡献者为:

胡芳碧 - 副教授 - 西南大学