新型细胞来源，可用于子宫或其他器官重建

来源：iNature

原标题：新型细胞来源，可用于子宫或其他器官重建，2019年中科院动物所周琪/李伟团队4连发

绝对子宫因素不孕症（AUFI）影响3-5％的女性并且具有多因素原因。 子宫移植是AUFI1的主要治疗选择。 或者，人造子宫可用作胚胎的孵化器。 生物人工子宫需要包括细胞成分的完整结构; 然而，不良细胞来源阻碍了生物人工子宫的临床应用。2019年5月14号，中科院动物所周琪/李伟团队等人在Cell Discovery上在线发表了题为Reprogramming of fibroblasts to uterine glandular epithelium by a chemical cocktail induction的文章。该研究发现了一种新的细胞来源，可用于子宫或其他器官的重建，并为治疗子宫不孕症和相关生殖医学疾病提供了潜在的价值。

另外，iNature还发现周琪/李伟团队：2019年2月25日，在Nature Communications上发表题为“Preciselycontrolling endogenous protein dosage in hPSCs and derivatives to model FOXG1syndrome”的文章，提出了一套hPSCs系统，利用CRISPR/Cas9和 SMASh技术，通过该系统可以在神经分化的多个阶段对内源性蛋白进行精确的剂量控制（中科院动物所胡宝洋团队开发精确调控内源蛋白丰度的新系统）；2019年1月8号，在Cell Reports在线发表题为“Derivation of Mouse Haploid Trophoblast Stem Cells”的研究论文，该论文报告了小鼠孤雌生殖的单倍体TS细胞（haTSCs）的产生，并表明补充FGF4和抑制Rho相关蛋白激酶（ROCK）能够维持其单倍体和发育潜力。另外，还证明了haTSC经历遗传操作并促进滋养层细胞谱系全基因组筛选的能力（周琪/李伟团队及帅领团队同时发文，建立了新型单倍体干细胞）。2019年4月23日。中国科学院动物研究所周琪、李伟等人在Cell Discovery杂志在线发表题为“Artificial sgRNAsengineered for genome editing with new Cas12b orthologs”的文章，该文章发现即使没有CRISPR阵列也可以促进Cas12b核酸酶进行精确的多重基因组工程（2019年3连发，中科院动物所周琪/李伟团队极大拓展了基因组编辑工具库）。

哺乳动物子宫腺上皮(Ge)是囊胚植入所必需的，其缺陷可导致不孕。Ge对卵巢激素雌激素(E2)和孕酮(P4)有反应，并诱导胚胎移植后白血病抑制因子(LIF)的表达。通过特定的转录因子或化学分子直接对成纤维细胞进行重新编程已有报道。然而，通过成纤维细胞重新编程获得子宫细胞的报道很少。在本研究中，研究人员报道了具有体外扩增和对卵巢激素反应能力的成纤维细胞的全化学诱导的子宫GE的产生和特性。该研究发现了一种新的细胞来源，可用于子宫或其他器官的重建，并为治疗子宫不孕症和相关生殖医学疾病提供了潜在的价值。

通过化学混合物将MEF重编程为ciGE

小鼠胚胎成纤维细胞(MEFs)在胚胎第13.5天(E13.5)分离，用FGF 2、BMP 4、mLif、1，4-DPCA(HIF Prolyl 4-羟化酶竞争性抑制剂)、A8-301(TGF-βI型受体碱5激酶抑制剂)组成的化学混合物培养。Chir-99021(GSK-3α/β抑制剂)诱导培养基(FBLDAC).简单地说，MEFs在诱导培养基中培养12天，然后保持在扩张培养基中。最后，获得FBLDAC诱导的上皮样细胞集落。此外，这些菌落可传代20次以上，在基质上-或10%FBS涂层培养皿上具有均匀的菌落形态和稳定的核型为“38 XX”或“38 XY”。这些细胞表达上皮细胞的特异性标记物，包括KRT 19、EpCAM、Cdh 1和增殖蛋白Ki 67。其次，研究还评价了裸鼠皮下移植诱导细胞和小鼠胚胎干细胞(ESCs)的致瘤性。结果表明，10只小鼠经诱导细胞移植2个月后，无畸胎瘤形成，10只小鼠移植3周后观察到8只畸胎瘤形成。

为了证实上皮细胞确实是由MEFs诱导而来的，研究人员从携带成纤维细胞特异性蛋白1(Fsp1)-CRE/ROSA26mTmG的转基因小鼠中分离到MEFs来追踪成纤维细胞。在Fsp1-CRE介导的膜靶向番茄表达切除后，成纤维细胞将永久表达膜靶向GFP。这些追踪细胞排除了上皮命运对细胞的污染，并根据图1A所示的过程诱导。在FBLDAC诱导后，诱导细胞出现绿色集落。免疫荧光法证实诱导细胞的上皮命运。

原文链接：

https://www.nature.com/articles/s41421-019-0096-8