动物实验视频曝光：花式撸鼠大法

来源：生物学霸

说起生物医药科研界的让人撕心裂肺的实验，动物实验肯定是其中一大块。裸鼠成瘤，各种疾病造（zuo）模（nie），让我们饱尝与鼠小弟的相爱相杀。

既然有牺牲，除了有尊严，还得有价值。如何让鼠小弟们的牺牲换来的数据逼格更高？自然少不了时下最火爆的动物体内基因转染技术。

提到动物体内基因转导，自然是少不了 AAV（腺相关病毒）了，今天我们就来介绍下，如何在各个脏器中进行 AAV 的活体注射。

其实，多脏器注射方式，说难也确实难，说不难也确实不难。

难！这么多脏器，这么多方法，都是精细操作，稍有不慎，鼠弟归天数据报销。

为啥又说不难呢？因为，汉恒整理了史上最全的动物注射方法实验视频！

限于篇幅，下文详细介绍了两种注射方式，想要查看全部注射视频，请点击「阅读原文」。

部分注射视频详解：

▶ 尾静脉注射：

感染部位：心脏、肝脏、AAV-BBB 感染全脑

把小鼠放入尾静脉注射的装置中（如果没有该装置，可以用 50 mL 的离心管自己制备一个，注意通气、固定即可）。

用 70% 的酒精消毒小鼠尾部。注意保持下属尾部温暖，太冷的话血管会收缩。

用左手食指拇指拉住小鼠尾巴，稍用力拉直，然后食指稍微向前向上，使尾巴稍微弯折。可以在弯折处进针注射病毒（27~30 G 胰岛素针，100 μL/小鼠）。

缓缓注射，完成后保持 5~10 秒防止病毒回流。

拔针，用手指或者干的无菌棉球或纱布按压几秒。

▶ 脑立体定位注射：

感染部位：脑部

麻醉-皮下注射麻醉剂 Xylazin/Ketamine 混合液（10 mg/kg, 100 mg/kg）（Xylazin/Ketamine，Sigma~Aldrich X1251, K2753）。

剃除小鼠头部眼睛到耳朵之间的毛发，放到立体定位仪的保暖托盘上。

归零牙齿和耳朵的标尺。并在小鼠的眼睛上涂上眼药膏（OcμLentumsimplex， Teva Pharmachemie），防止眼睛干掉。

将小鼠上门牙固定到固定板的槽内，确保头部保持固定。调节 Bregma 和 Lambma 在同一矢状线上和水平面。务必确保小鼠鼻子居中、稳定。

用手术刀划开小鼠头部皮肤，用手术刀刮掉表面硬脑膜，如有血迹请用棉签擦干，确保 bregma 和 lambda 位置清晰可见。

把 bregma 坐标归位 0（X，Y，Z=0），确保 lambda 位置与 bregma 位于同意水平面上。

根据目的脑区设定好坐标。一旦坐标固定，用 marker 笔在颅骨做出标记，并在 10 秒内在颅骨钻出一个约 0.015 mm 的孔。钻的过程务必小心，以防损伤脑组织。

把带注射 AAV 吸入针内，根据上一步设好的坐标进针。进针完成后以 0.05~0.1 μL/min 的速度缓缓注射病毒，通常一只小鼠注射体积在 0.05~2 μL 之间。

注射完毕，保持 10 min，然后慢慢回针。

操作过程中如有血流出需要用棉签及时吸干。

不单单是 AAV，其他的 drug，particle 的注射方式也如出一撤，只要你需要做到动物实验，汉恒动物实验视频一定会对你有所帮助。我们的口号是：「课题生生不息，视频更新不止！」

不过对于 AAV，心肝脾肺肾脑分别适用什么血清型？以及各个器官该怎么注射呢？

多脏器 AAV 注射方式及注意点

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