自然免疫或DNA疫苗免疫，均能为恒河猴SARS-CoV-2再感染提供免疫保护

来源：BioArt

COVID-19大流行已对全球公共卫生安全造成重大威胁，然而，我们对SARS-CoV-2的免疫发病机制还不够了解，尤其是对SARS-CoV-2感染的保护性免疫评估，目前仍不清楚。

2020年5月20日， 哈佛医学院Dan Barouch团队在Science同时在线发表了两篇研究论文SARS-CoV-2 infection protects against rechallenge in rhesus macaques和DNA vaccine protection against SARS-CoV-2 in rhesus macaques ，对恒河猴模型中的SARS-CoV-2感染诱导的自然免疫以及DNA疫苗引起的主动免疫的保护性进行了探讨，研究发现，恒河猴模型中SARS-CoV-2感染诱导的自然抗体反应可以保护重复感染的发生。另外，DNA疫苗也能为恒河猴提供保护效果，有效防止SARS-CoV-2感染，可作为COVID-19的候选疫苗。

研究人员首先建立了SARS-CoV-2感染的恒河猴模型，将9只恒河猴分为3组，分别接种不同剂量的病毒，在鼻拭子（NS）和支气管肺泡灌洗液（BAL）中均检测到相当程度的病毒载量，血浆中未检测到，此外，所有恒河猴还出现了不同程度的食欲下降，高剂量组出现轻度瞬时的中性粒细胞和淋巴细胞减少，但未观察到发烧、体重减轻以及呼吸困难等现象。

免疫组化（IHC）、原位RNA杂交（RNAscope）以及循环免疫荧光（CyCIF）结果显示SARS-CoV-2主要感染肺部细胞、支气管上皮细胞等，以及出现中性粒细胞渗透和间质性肺炎症状。

SARS-CoV-2诱导急性间质性肺炎。

重要的是，恒河猴在第35天均出现了SARS-CoV-2特异性的抗体免疫和细胞免疫反应，高剂量组的T细胞反应更为强烈，病毒完全清除后，研究人员用相同剂量重新免疫9只恒河猴，同时免疫3只未感染过的恒河猴作为对照。结果显示，9只中的5只可以免受感染，其余4只虽能检测到低水平的病毒载量，但很快下降至检测限以下。所有9只恒河猴基本未观察到临床症状。

值得注意的是，二次免疫的恒河猴快速诱导出了特异性抗体反应和T细胞反应，且二次免疫第14天的抗体滴度显著高于首次感染后第14天的水平。这些结果说明免疫过的恒河猴表现出了免疫记忆，SARS-CoV-2感染诱导的免疫记忆可以为再次感染提供保护性免疫功效。这一结果也和中国医学科学院秦川团队此前的结果相互印证（SARS-CoV-2感染的恒河猴模型中，存在结膜感染途径，康复后不会再次感染）。

随后，研究人员开发了多种不同形式S蛋白的DNA疫苗（S全长、S.dCT、S.dTM、S1、RBD、S.dTM.PP），利用上述模型进行评价，共免疫了35只恒河猴，其中10只为对照，在第0周和第3周通过肌肉注射接种5 mg DNA疫苗，在第5周观察到疫苗诱导出了可以结合和中和假病毒和活病毒的中和性抗体，包括多个亚型和具有不同的效应器功能。并在第5周诱导出了S蛋白特异性的T细胞反应（主要为Th1反应）。

第6周，即增强免疫3周后，研究人员给所有恒河猴感染SARS-CoV-2，与对照组相比，除了S.dTM组外，其他疫苗组均显示出了更轻的临床症状和更低水平的病毒RNA。相关性分析结果表明，疫苗的保护效果与抗体的滴度显著相关。且在应对SARS-CoV-2感染过程中，中和性抗体起主要作用，一些先天免疫效应器功能起辅助作用。

总而言之，研究者首先建立了SARS-CoV-2感染的恒河猴模型，确定了SARS-CoV-2感染自然诱导的免疫反应可以有效保护恒河猴应对二次感染。开发的DNA疫苗在恒河猴模型中诱导出的抗体与康复患者抗体水平相当，疫苗的保护效果与抗体的滴度显著相关。效果最好的全长S蛋白DNA疫苗可以使鼻黏膜和支气管肺泡灌洗液的病毒载量下降数千倍。这些结果为非人灵长类的疫苗研究提供有力的支持。

原文地址：https://science.sciencemag.org/content/early/2020/05/19/science.abc4776https://science.sciencemag.org/content/early/2020/05/19/science.abc6284